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VB6測定大鼠維生素B6ELISA試劑盒

更新時間:2020-06-30      瀏覽次數(shù):855

Elisa試劑盒 性能:

 1.準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

 2.靈敏度:低檢測濃度小于10 pg/ml。

 3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

 4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

 有效期:6個月

需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm檢測波長濾光片,570nm或630nm校正波長濾光片) 。
2. 洗板機(可調(diào)注液量,保證每孔洗液加至0.35ml而不溢出)。
3. 超凈工作臺,生物安全柜,通風(fēng)柜。
4. 高精度單道加液器(量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
5. 高精度多道加液器(8道或12道,量程為50-300μl).
6. 37℃恒溫箱。
7. 低溫離心機。
8. 電冰箱(4℃,-20℃,-86℃).
9.  漩渦混合儀,低頻振蕩器等

 

 

樣本處理及要求

1.  血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。

 

 

樣本收集保存

  1、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

  2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

  3、細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

  4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

  5、保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

 

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